한국의 동충하초 II. 동충하초의 연구 방법1. 동충하초의 채집 방법과 보존 (3) 슬라이드 제작(1)

한국의 동충하초 II. 동충하초의 연구 방법

1. 동충하초의 채집 방법과 보존 (3) 슬라이드 제작(1)

2021년 06월 08일. 오늘도 우리 남은 인생의 첫날을 맞이하는 화요일로 오늘만은 나와 남을 위하여 화를 내지 말아야 할 좋은 날입니다. 오늘도 성재모동충하초를 잘 재배하기 위하여 돌보면서 한국의 동충하초 동충하초의 채집 기록을 살펴보는 시간을 가지었다. 언제나 고객님에게 고마운 마음을 드리며 바르고 천천히 흔들림이 없이 그냥 가면서 이렇게 글을 올리는 것만으로도 기적이고 축복으로 알고 걸림이 없는 하루를 보내려고 한다. 오늘 또 하루를 선물로 받았네요.

 

한국의 동충하초를 개정판을 출판하려고 마음먹고 쓰기를 하면서 내가 만나는 모든 인연에 고마운 마음을 가질 수 있는 것이 얻은 것 중에 하나다. 사람 사람 하나의 지혜가 이렇게 좋은 세상을 만들어 놓았으니 말이다. 한다. 지금 내가 이렇게 책상에 앉아서 쓰는 글 자체가 신기하고 믿을 수가 없다. 내 분야뿐만 아니라 모든 분야가 이렇게 발전하여 모든 사람이 누리고 있으니 말이다. 이렇게 좋은 세상을 나 아닌 다른 사람을 배려하고 살면 더 좋은 삶이 될 텐데 데라는 생각도 하여 본다. 슬라이드를 보고 현미경에서 미세구조를 사진을 찍은 것을 두고 정리하는 시간을 가지어 본다. 참 하루가 빨리 지나간다.

 

오늘은 슬라이드를 보면서 찍은 사진과 그린 미세구조 사진을 올려놓고 이 일을 같이한 제자에게 고마운 마음을 가지며 바르고 천천히 흔들림이 없이 그냥 가려고 한다. 우리 모두 사는 동안 최선을 다해 후회 없는 삶을 살았음 좋겠습니다. 그저 물처럼 흐르는 인생으로 늘 행복하고 웃음 가득 찬 나날이 되기를 기원합시다. 더욱 건강하시고, 범사가 잘 되는 복을 누리시기를 기원합니다. 고맙고 고맙습니다.

 

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II. 동충하초의 연구 방법

1. 동충하초의 채집 방법과 보존 (3) 슬라이드 제작(1)

 

슬라이드 제작에 주로 사용되는 염색약이나 시약은 (lacto-phenol, KOH, Phloxine, Congo red, aceto-orcein 등이고, 만드는 방법은 아래와 같다.

lactophenol : Phenol(crystal) 20g, lactic acid 20g, glycerol 40g 증류수 20m로 동충하초균를 관찰하기 위해 슬라이드 제작에 가장 흔하게 사용되는 시약이다. 그리고 조직을 좀 더 선명하게 염색할 필요가 있을 때는 락토페놀에 cotton blue, aniline blue, 또는 acid fuchsine 등을 첨가하면 동충하초균의 균사체와 포자를 더욱 선명하고 아름답게 관찰할 수가 있다.

Lactic acid(젖산)는 수화되지 않은 젖산은 다른 첨가제의 사용 없이 반영구적인 슬라이드의 제작에 이용된다.

Aceto-orcein : orecin 1.0g, acetic acid(glacial) 45 ml 오르세인(orcein)을 뜨거운 아세트산(acetic acid)에 녹여 증류수로 1:1이 되도록 희석하여 이를 약 5분간 끓인다. 끓인 후 손실된 분량은 50% 아세트산으로 보충하며, 녹지 않은 잔여물은 여과지로 두세 차례 걸러낸 다음 사용한다. 또, 광학현미경의 초록색 필터를 통하여 관찰하면 보다 선명하게 관찰할 수 있다.

 

The dyes and organic reagents used for staining of the slides include lactophenol, 3% potassium hydroxides solution, phloxine, Congo red, aceto-orcein, and many other possible stains. The recipes for preparing some of these reagents and stains follow:

Lactophenol - phenol, 20 g; lactic acid, 20 g; glycerol, 40 g; distilled water, 20 ml - is a commonly used mounting medium. In order to stain the tissues more clearly, a few drops (according to one's own preferences) of concentrated stock solutions of cotton blue, aniline blue, acid fuchsin or a number of other acid-tolerant stains can be added to the lactophenol. This will improve the observation of individual fungal structures in the preparation. The phenol crystals are an optional addition to the recipe that enhances its preservative qualities.

Lactic acid (with or without the addition of acid-tolerant stains) is widely used as a mounting medium. These slides can be stored semi-permanently but will desiccate sooner than lactophenol unless ringed well with nail polish, resin, or some other similar hydrophobic sealing compound.

Aceto-orcein - dissolve orcein (1 g) in hot glacial acetic acid (45 ml) for at least 5 minutes in a chemical hood; add distilled water (45 ml) and heat again for ca. 5 minutes; then adjust the volume to 100 ml by adding 50% acetic acid and centrifuge or filter to removed undissolved and precipitated material. This stain is a very versatile and excellent mounting medium for general microscopic use despite its original use as a nuclear stain. The acidity of the medium is high enough to wet many hydrophobic structures that may be very difficult to mount in lactophenol or lactic acid. Visual contrast with material mounted in aceto-orcein can be enhanced by using a green filter on the microscope's light source.