7. SDS-PAGE gel상에서 apoB-100의 protection 비교
노랑다발 동충하초 분획물의 항산화 억제 효과를 살펴보기 위하여 LDL 산화로 인한, apoB-100의 degradation 정도를 각 분획물의 효과와 비교하였다. 동충하초 추출물의 동맥경화 억제 효과는 SDS-PAGE상에서 LDL의 성분인 apoB-100의 degradation 정도를 살펴보았다. Fig. 9에서와 같이, 정상적인 LDL의 경우 band가 두껍게 나타나는 반면, 산화된 LDL의 경우 apoB-100의 degradation으로 인해 band가 거의 보이지가 않는다. 그러나, 동충하초의 용매 추출물을 첨가하였을 때는 정상적인 LDL과 band가 비슷해지고 있음을 알 수 있다. 즉 LDL 산화로 인한 apoB-100의 degradation을 동충하초 추출물이 protection 함을 알 수 있었다. Methanol 추출물의 첨가에서는(Fig. 9), 400ug 이상의 sample을 첨가하였을 때 LDL의 주요 단백질인 Apo B-100가 보호되는 결과를 보여주었다. 또한 hexane 추출물은 400ug 이상의 첨가에서 효과가 있었으며, buthanol 추출물 및, ethyl acetate는 모두 400ug 이상의 첨가에서 효과가 있었으며, water추출물은 1000ug 이상의 첨가에서 효과를 보여, 가장 저조한 결과를 보였다(Fig. 19). 그림의 결과와 같이, 산화된 LDL의 경우 degradation으로 인해 band가 거의 보이지 않고 있으며 동충하초 분획물을 첨가하였을 때는 LDL의 band와 비슷하게 나타나고 있다. LDL의 산화로 인한 apo B-100의 degradation을 동충하초 분획물이 protection하고 있음을 보여주고 있다. 여기에서는 methanol, hexane, butanol, ethyl acetate의 분획물이 좋은 효과r를 보였으며, water 추출물은 효과를 나타내지 못했다(fig 10).
400 500 1000 1500 2000 (단위 : ㎕)
(-)
(+)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
(1) methanol
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
Sample (ul) |
PBS |
H2O |
DMSO |
100 |
200 |
300 |
400 |
500 |
1000 |
1500 |
2000 |
Fig. 9 Protection of Apo B-100 of LDL Cordyceps staphylindaecola methanol fraction to LDL oxidation
Number |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
Sample(ul) |
H2O |
DMSO |
100 |
200 |
300 |
400 |
500 |
1000 |
400 500 1000 300 400 500 1000
1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8
(2) hexane (3) n-butanol
400 500 1000
↓ ↓ ↓
1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8
(4) ethyl acetate
(5) water
Fig. 10 Protection of Apo B-100 of LDL Cordyceps staphylindaecola fraction to LDL oxidation.
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