강원도 일대를 중심으로 국내에서 채집한 번데기동충하초(Cordyceps militaris) 균주와 번데기동충하초의 인공자실체로부터 얻은 단포자균주를 공시균주로하여 유전적 변이도를 관찰하는 것이다. 번데기동충하초의 불완전세대 및 배양적 특성을 관찰하여 균주간의 차이정도를 조사하고 인공자실체를 형성시켜 이로부터 단포자분리를 행함으로써 균주간 그리고 단포자균주간 유전적 변이도를 조사하여 본 균의 향후 실용화에 있어서의 유전적 안정성을 검증한다. 먼저 형태적인 특징과 유전적인 변이간에 관계를 조사하기 위해 번데기동충하초의 불완전세대의 현미경적 특징과 차이를 알아보고 균주간의 배양적 특성 차이를 조사한다. 번데기동충하초의 단포자균주와 공시균주를 대상으로 균의 유전적 변이도 검증에 많이 사용되고 있는 방법인 ribosomal DNA내에 있는 internal transcribed spacer(ITS)지역을 PCR-RFLP방법으로 분석한다. 또한 번데기동충하초의 total genomic DNA를 대상으로한 RAPD방법으로도 유전적 변이도를 관찰할 것이다. RFLP와 RAPD에서 나타난 DNA단편들을 가지고 유전적 거리 값을 구하며 이렇게 구한 유전적 거리 값을 NTSYS-pc software에 입력하여 phenetic analysis를 수행한 다음 각 균주간의 유전적 연관성을 알아보기 위해 UPGMA (Unweighted pair-group arithmetic average)분석방법을 이용하여 phenogram을 작성한다. 또한 균주들간의 유전적 연관성과 각각의 그룹 내에서의 유전적 변이정도를 알아보기 위하여 유전적 거리 값의 평균값을 구한다. 이렇게 얻어진 평균값을 바탕으로 번데기동충하초의 기주적․지리적 차이에 따른 근연관계를 조사하고 불완전세대 및 배양적 특성에 따른 근연관계를 조사한다.
본 실험의 연구결과로 국내에 자생․분포하는 귀중한 유전자원중의 하나인 번데기동충하초의 향후 실용화 및 산업적 안정성에 있어서의 기초자료를 제공할 수 있으며 세계최초로 번데기동충하초의 유전적 변이도를 분석하여 분자생물학적 분류체계에 대한 자료를 마련할 수 있다.
본 보고서를 한국과학재단의 연구비로 수행된 한국산 번데기 동충하초(Cordyceps militaris)의 분자생물학적 분류체계 확립에 관한 연구(971-0602-010-2)의 연구결과 보고서로 제출합니다.
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