상황버섯의 화합물 Ⅴ

 화합물 Ⅴ

화합물 Ⅴ는 백색의 침상결정으로 IR spectrum에서 3284 cm-1에서 O-H, 2959 cm-1에서 aliphatic C-H, 1038 cm-1에서 C-O에 기인하는 흡수를 나타내고 있어 지방족 화합물임을 추정할 수 있었다 (Fig. 5.1).

EI-Mass spectrum에서 m/z 428에서 molecular ion peak [M+]를, 그리고 m/z 410, 396, 363에서 분자이온으로부터 각각 H2O, O2, [O2+H2O+CH3]가 탈리된 fragment ion peak들을 관찰할 수 있었다 (Fig. 5.2).

1H-NMR spectrum에서는 δ0.75 (3H, 18-CH3) 및 δ0.81 (3H, 19-CH3)에서 angular methyl group의 singlet signal들이 나타나고 있으며, δ0.75 (3H, 27-CH3, J=7.0Hz), δ0.76 (3H, 26-CH3, J=6.9Hz), δ0.84 (3H, 28-CH3, J=6.8Hz) 및 δ0.93 (3H, 21-CH3, J=6.6Hz)에서 secondary methyl group의 doublet signal을 관찰할 수 있었다. δ3.90 (1H)에서 3-H의 multiplet signal이 관측되었는데, 이는 인접한 dioxy group의 탈가림 효과에 의해 free sterol인 화합물 Ⅳ (ergosterol)에 비해 저자장에서 나타나고 있다. 이중결합에 기인하는 olefinic proton signal이 δ6.17 (1H, 6-H) 및 δ6.44 (1H, 7-H)에서 J=8.5Hz로 doublet으로 관찰되었는데, 이것 역시 인접한 dioxy group의 탈가림 효과에 의해 화합물 Ⅳ에 비해 저자장에서 나타나며, 특히 1H-1H COSY spectrum에서 이 두 signal들이 서로 correlation하는 것을 알 수 있었다. 이상의 결과로 peroxide group은 C5 및 C8 위치에 결합되어 있음을 알 수 있었다. 한편 side chain의 이중결합에 기인한 signal이 δ5.07 (1H, 23-H, J=8.4, 15.3Hz)과 δ5.15 (1H, 22-H, J=7.5, 15.3Hz)에서 각각 doublets of doublet으로 관측되었다. Mass spectrum의 m/z 396 peak와 1H-NMR spectrum의 δ6.17 및 δ6.44의 signal은 ergosterol peroxide의 특징적인 peak들이다 (Fig. 5.3, 5.7).120)

13C-NMR spectrum에서는 총 28개의 signal을 나타내었고, 각각의 다중도는 DEPT experiment에 의하여 결정하였는데, 6개의 methyl carbon, 7개의 methylene carbon, 11개의 methine carbon 및 4개의 quarternary carbon의 존재를 확인할 수 있었다 (Fig. 5.4, 5.5). δ12.84 (C-18), 17.53 (C-28), 18.15 (C-19), 19.61 (C-27), 19.93 (C-26) 및 20.60 (C-21)에서 methyl carbon signal이 관측되었고, δ66.42에서 C-3 carbon signal이 down field shift 하여 나타나고 있는 것으로 보아 3번 위치가 hydroxylation되어 있는 것을 추정할 수 있었다. 한편 1개의 olefinic proton의 결합에 의한 carbon signal들이 δ130.71 (C-6) 및 δ135.36 (C-7)에서 관측되고 있고, 이외에도 oxygenated quaternary carbon signal들이 δ79.40 (C-5)과 δ82.14 (C-8)에서 각각 나타남을 알았다. 또한 side chain의 double bond에 의한 carbon이 δ135.17 (C-22)및 δ132.30 (C-23)에서 관측되어 환내에 1개, 환밖에 1개를 갖는 peroxyergosterol 유도체로 추정하였다 (Fig. 5.4～5.6).

이상의 실험결과 및 문헌과의 비교로 화합물 Ⅴ를 분자량 428, 분자식 C28H44O3인 5,8-epidioxyergosta-6,22-dien-3-ol인 ergosterol peroxide로 확인 동정 하였다.119,120)

Ergosterol peroxide는 Lasiosphaera nipponica,120) Lepiota americana,30) Cordyceps sinensis31) 등 많은 fungus로부터 분리되었다.

이들은 유리형30,120) 또는 배당체 형태31)로 분리되었으며, 자연 상황 자실체57)에서도 보고된 바 있고, 면역조절작용,30) 항암30,31) 및 항바이러스 작용32) 등의 활성이 있음이 보고 되었다.

Ergosterol peroxide는 생화학적으로 효소산화에 의해 생성되거나123) 또는 광산화에 의해 생성되는 것으로 보고되어 있으며119), 병원성 균류인 Sporothrix schenckii의 효모로부터 분리된 ergosterol peroxide는 이 균류의 독성에 관여하며,123) 조류인 Dunaliella salina의 plasma membrane으로부터 분리된 sterol peroxide (ergosterol peroxide, 7- dehydroporiferasterol peroxide)는 plasma membrane의 막투과성에 관여하는 것으로 보고되어 있다.119)